微分干涉顯微鏡用于觀察活細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)的細(xì)節(jié),利用兩束光線通過光學(xué)系統(tǒng)中相位的變化發(fā)生相互干涉,從而增強(qiáng)樣品反差,實(shí)現(xiàn)對非染色活細(xì)胞觀察。微分干涉顯微鏡適于研究活細(xì)胞中較大的細(xì)胞器。將微分干涉顯微鏡接上錄像裝置,可以觀察記錄活細(xì)胞中的顆粒及細(xì)胞器的運(yùn)動。
原理介紹:
當(dāng)兩束光通過光學(xué)系統(tǒng)時會發(fā)生相互干涉,如果相位相同,干涉的結(jié)果是亮度增強(qiáng),反之,就會相互抵消變暗,這就是光波的干涉現(xiàn)象。
微分干涉顯微鏡是以平面偏振光為光源,光線經(jīng)棱鏡折射后分成兩束,在不同時間經(jīng)過樣品的相鄰部位,然后經(jīng)過另一棱鏡將這兩束光匯合,從而樣品中厚度上的微小差別就會轉(zhuǎn)化成明暗區(qū)別,增加了樣品反差,造成了標(biāo)本的人為三維立體感,類似大理石上的浮雕。
微分干涉顯微鏡適于研究活細(xì)胞中較大的細(xì)胞器,如果接上錄像裝置可以記錄活細(xì)胞中的顆粒以及細(xì)胞器的運(yùn)動。
微分干涉顯微鏡的主要特點(diǎn)有:
1、對金相樣品的制備要求降低,對于某些樣品,甚至只需拋光而不必腐蝕處理即可進(jìn)行觀察。優(yōu)點(diǎn)是可以觀察到樣品表面的真實(shí)狀態(tài),如將試樣拋光后在真空下發(fā)生馬氏體相變,不用腐蝕就可以觀察到馬氏體的相變浮凸。
2、所觀察到的表面具有明顯的凹凸感,呈浮雕狀,樣品各組成相間的相對層次關(guān)系都能顯示出來,對顆粒、裂紋、孔洞以及凸起等都能作出正確的判斷,提高了金相檢驗(yàn)準(zhǔn)確性,同時也增加了各相間的反差。
3、用微分干涉相襯法觀察樣品,會看到明場下所看不到的許多細(xì)節(jié),明場下難于判別的一些結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)或缺陷,可通過微分干涉進(jìn)行反差增強(qiáng)而容易判斷。
4、微分干涉相襯法基于傳統(tǒng)的正交偏光法,又巧妙地利用了在渥拉斯頓棱鏡基礎(chǔ)上改良的DIC棱鏡和補(bǔ)色器(λ-片)等,使所觀察的樣品以光學(xué)干涉的方法染上豐富的色彩,從而可利用彩色膠卷或者數(shù)碼產(chǎn)品(CCD 攝像頭以及數(shù)碼相機(jī))進(jìn)行彩色金相顯微攝影。