光學顯微鏡在使用前需要進行一系列的技術(shù)調(diào)節(jié),以確保獲得清晰、準確的觀察效果。以下是一些主要的技術(shù)調(diào)節(jié)步驟:
樣本放置與固定:將樣本放置在顯微鏡的載物臺上,并使用固定裝置將其穩(wěn)定。這樣可以防止樣本在觀察過程中移動,影響觀察效果。
粗調(diào)焦:通過轉(zhuǎn)動粗調(diào)焦輪來移動目標鏡頭(即物鏡)與樣本之間的距離。開始時,將目標鏡頭迅速向下移動到Z低位置,然后慢慢地抬起目標鏡頭,直到看到一個模糊但可見的圖像出現(xiàn)在視野中。這表明已經(jīng)接近了正確的聚焦點。
細調(diào)焦:在細調(diào)焦輪上進行微小旋轉(zhuǎn)以進一步改善圖像清晰度。細致地調(diào)整直至達到所需清晰度為止。
調(diào)節(jié)光源:轉(zhuǎn)動光源調(diào)節(jié)旋鈕,調(diào)整光源的亮度,使視野中的光線適中,既不過亮也不過暗。同時,根據(jù)需要選擇合適的濾光片,以調(diào)節(jié)光線的顏色和強度。
調(diào)節(jié)聚光鏡:轉(zhuǎn)動聚光鏡的調(diào)節(jié)環(huán),使聚光鏡與物鏡相匹配,以獲得Z佳的光線聚焦效果。如果看到的不是一個邊緣清楚的多邊形,則說明光路中的聚光鏡上下位置不準確,此時需要轉(zhuǎn)動聚光鏡的上下調(diào)節(jié)旋鈕,使聚光鏡緩慢上升或下降,直到視場中形成一個邊緣清晰的多邊形。
對中調(diào)節(jié):如果多邊形不在視野的中心,說明光路有偏移,需要調(diào)節(jié)聚光器對中螺釘,即兩個銀色的旋鈕,使多邊形在視野的中心。然后將視場光闌慢慢放大,當多邊形正好外切于視場的時候就是視場光闌的Z佳工作位置。這樣聚光鏡的光軸就調(diào)到了與照明光路以及成像光路的光軸合軸。
選擇合適的物鏡和目鏡:根據(jù)需要選擇合適的物鏡和目鏡。物鏡和目鏡是光學顯微鏡中的兩個關(guān)鍵部件,合理選擇具有較高數(shù)值孔徑的物鏡和目鏡可以提高分辨率。
此外,在使用光學顯微鏡時還需要注意以下幾點:
保持顯微鏡的清潔,及時清理樣本、載玻片和任何其他可能影響圖像質(zhì)量的因素。
避免手部不必要地接觸顯微鏡或工作臺面等導致震動。
根據(jù)需要提高光源的質(zhì)量和強度,如使用激光器等高質(zhì)量光源。
采用抗散射技術(shù)減少散射現(xiàn)象,提高分辨率。
通過以上技術(shù)調(diào)節(jié)和注意事項,可以確保光學顯微鏡獲得清晰、準確的觀察效果。